Application
3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine (TMB) is a noncarcinogenic substitute (Ames test negative) for benzidine suitable as peroxidase substrate for use in ELISA procedures. The substrate produces a soluble end product that is pale blue in color and can be read spectrophotometrically at 370 or 620-650 nm. The TMB reaction may be stopped with 2 M H2SO4 (resulting in a yellow color), and read at 450 nm. A sensitive and specific reagent for the detection of blood, assay of hemoglobin, assay of peroxidases.
3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine has been used:
as a supplement in Man-Rodosa-Sharpe (MRS) agar plate, to stains the lactobacilli colonies blue in the presence of O2
as a substrate solution for ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)
in myeloperoxidase activity assay to quantify neutrophil
Biochem/physiol Actions
3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine/TMB can be used as a chromogen to increase the progression of product obtained in peroxidase reaction. In food and environmental decontamination procedures, TMB can be used in in situ free available chlorine (FAC) monitoring of chlorite-based sanitizers.
کاربرد
3,3′,5,5′-تترامتیل‌بنزیدین (TMB) یک جایگزین غیرسرطان‌زا (تست ایمز منفی) برای بنزیدین است و به عنوان سوبسترای پراکسیداز، برای استفاده در روش‌های ELISA مناسب است. این سوبسترا یک محصول نهایی محلول به رنگ آبی کم‌رنگ تولید می‌کند که می‌تواند به روش اسپکتروفتومتری در ۳۷۰ یا ۶۲۰-۶۵۰ نانومتر خوانده شود.
واکنش TMB ممکن است با H2SO4 2 مولار متوقف شود (که منجر به رنگ زرد می‌شود) و در ۴۵۰ نانومتر خوانده شود.
TMB یک معرف حساس و اختصاصی برای تشخیص خون، سنجش هموگلوبین و سنجش پراکسیدازها است.
موارد استفاده از 3,3′,5,5′-تترامتیل‌بنزیدین:
به عنوان مکمل در پلیت آگار Man-Rodosa-Sharpe (MRS)، برای رنگ‌آمیزی کلنی‌های لاکتوباسیل‌ها به رنگ آبی در حضور O2.
به عنوان محلول سوبسترا برای ELISA (آزمون ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم).
در سنجش فعالیت میلوپراکسیداز برای تعیین کمیت نوتروفیل‌ها.
کنش های بیوشیمی/فیزیولوژیکی
3,3′,5,5′-تترامتیل‌بنزیدین (TMB) می‌تواند به عنوان یک کروموژن (ماده‌ای که تولید رنگ می‌کند) برای افزایش پیشرفت محصول حاصل از واکنش پراکسیداز استفاده شود.
در روش‌های ضدعفونی در حوزه غذا و محیط زیست، TMB می‌تواند برای پایش کلر آزاد در دسترس (FAC) در محل (in situ) در ضدعفونی‌کننده‌های مبتنی بر کلریت، به کار رود.
