RIPA (Radio-Immunoprecipitation Assay) Buffer is supplied as a ready to use solution that requires no preparation. It minimizes non-specific protein-binding interactions to keep background low, while allowing most specific interactions to occur, enabling studies of relevant protein-protein interactions. It is widely used in applications such as immunoprecipitation since most antibodies and protein antigens are not adversely affected by the components of this buffer.
Radioimmunoprecipitation assay buffer (RIPA buffer) is a lysis buffer used for rapid, efficient cell lysis and solubilization of proteins from both adherent and suspension cultured mammalian cells.
Application
RIPA Buffer enables efficient cell lysis and protein solubilization while avoiding protein degradation and interference with the proteins′ immunoreactivity and biological activity. RIPA Buffer also results in low background in immunoprecipitation and molecular pull-down assays. Compatible with EZview Affinity Gels.
RIPA Buffer has been used as a reagent for cell lysis in the following experimental studies:
Fibroblast-based deep phenotyping of the peripheral tissue, which facilitates the mechanistic disease stratification in sporadic Parkinson′s disease (sPD).
Demonstrating the inhibition of oxidative phosphorylation (OXPHOS), which can activate the mixed lineage kinase domain-like protein (MLKL)-dependent necroptosis in human lung epithelial cells.
توضیحات
بافر RIPA (Radio-Immunoprecipitation Assay) به عنوان یک محلول آماده عرضه می‌شود که نیازی به آماده‌سازی ندارد. این بافر تعاملات پروتئینی غیر اختصاصی را به حداقل می‌رساند تا پس‌زمینه (بک‌گراند) پایین بماند، در حالی که اجازه می‌دهد اکثر تعاملات اختصاصی رخ دهند، و این امر مطالعه تعاملات پروتئینی مرتبط را ممکن می‌سازد. از آن به طور گسترده در کاربردهایی مانند ایمونورسوبال استفاده می‌شود، زیرا اجزای این بافر معمولاً تأثیر نامطلوبی بر اکثر آنتی‌بادی‌ها و آنتی‌ژن‌های پروتئینی ندارند.
بافر RIPA یک بافر لیزکننده است که برای لایز سریع و مؤثر سلول و حل کردن پروتئین‌ها از هر دو سلول‌های پستانداران که به صورت چسبنده و یا شناور کشت داده شده‌اند، استفاده می‌شود.
کاربرد
بافر RIPA، لیز مؤثر سلولی و حل شدن پروتئین‌ها را امکان‌پذیر می‌سازد، در حالی که از تخریب پروتئین و تداخل با ایمونوراکتیویته و فعالیت بیولوژیکی آن‌ها جلوگیری می‌کند. بافر RIPA همچنین در آزمایش‌های ایمونورسوبال و پُل‌دان (pull-down)، پس‌زمینه (بک‌گراند) پایین ایجاد می‌کند. این بافر با ژل‌های EZview Affinity Gels سازگار است.
از بافر RIPA به عنوان یک واکنش‌گر برای لایز سلولی در مطالعات تجربی زیر استفاده شده است:
-
فنوتیپینگ عمیق بر پایه فیبروبلاست بافت محیطی، که به طبقه‌بندی مکانیکی بیماری پارکینسون پراکنده (sPD) کمک می‌کند.
-
نشان دادن مهار فسفوریلاسیون اکسیداتیو (OXPHOS)، که می‌تواند باعث فعال شدن پروتئین MLKL و در نتیجه نکروپتوز وابسته به آن در سلول‌های اپیتلیال ریه انسان شود.
